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Ampha X30高內(nèi)涵細(xì)胞儀
日期:2024-07-18 14:19:57

單細(xì)胞檢測的得力助手!



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高通量 多參數(shù) 非標(biāo)記 實(shí)時無損檢測!


Ampha X30高內(nèi)涵細(xì)胞儀 開創(chuàng)了單細(xì)胞分析的新紀(jì)元,通過整合微流控技術(shù)、電阻抗技術(shù)與多頻電場技術(shù),能夠在微流體精準(zhǔn)參考條件下,實(shí)現(xiàn)流動態(tài)單細(xì)胞的高通量、連續(xù)、無損阻抗檢測,實(shí)時獲得細(xì)胞活力、數(shù)量、濃度等信息,并追蹤細(xì)胞分化、衰老、凋亡及癌變等生理狀態(tài)。與常規(guī)細(xì)胞分析儀相比,Ampha X30高內(nèi)涵細(xì)胞分析儀具有非標(biāo)記、多參數(shù)、低污染、檢測速度快、標(biāo)準(zhǔn)化程度高等顯著優(yōu)勢,是細(xì)胞工廠構(gòu)建與優(yōu)化環(huán)節(jié)不可或缺的強(qiáng)有力工具,可應(yīng)用于食品加工、生物能源、生物制藥等生物加工領(lǐng)域。


工作原理:

基于細(xì)胞膜的電特性(膜電容和膜電阻),當(dāng)不同大小和活性的細(xì)胞隨懸浮液流經(jīng)廣頻(0-30 MHz)交流電場時將產(chǎn)生不同的電阻抗信號,經(jīng)解析獲得細(xì)胞的濃度、數(shù)量、活性及大小等信息。如下圖所示:A)細(xì)胞在不同頻率的交流電場中的檢測結(jié)果:低頻電場反映細(xì)胞的體積特性即電直徑,高頻電場反映細(xì)胞的介電特性即細(xì)胞活性;B) 微流控芯片;C)細(xì)胞電阻抗信號(藍(lán)色實(shí)部即電阻信號,綠色虛部即容性電抗信號),細(xì)胞膜完整性決定容性電抗的大小,故可通過虛部信號來區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞,最終以阻抗相位角-振幅散點(diǎn)圖反映出來。


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Ampha X30信號的采集和轉(zhuǎn)導(dǎo)


應(yīng)用領(lǐng)域:


高精確度:


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圖1. 酵母活性(Ampha X30與PI熒光染色法)

圖2. BL2細(xì)胞濃度(Ampha X30與Neubauer血球計數(shù)板)


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圖3. 感染桿狀病毒(BV)后Sf9昆蟲細(xì)胞的變化(Ampha X30與Countess?自動細(xì)胞計數(shù)儀)


技術(shù)參數(shù)

通用型芯片:

15×15μm、30×30μm50×50μm、80×80μm 選配

測量頻率范圍:

0.1 MHz ~30 MHz

測量頻率選擇:

可同時選擇1-4個測量頻率

測量體積范圍:

250 ~500μl

測量濃度范圍:

0~2×107cells/ ml

測量粒徑范圍:

1 ~50μm

采樣流量范圍:

3 ~50μl/ min

適配樣品管

標(biāo)準(zhǔn)5ml流式細(xì)胞管

寸:

330mm×370mm×420mmH*W*D

量:

11.4Kg

源:

24V DC ± 5 %max. 3 A,< 90 W;支持24V可充電電池

數(shù) 據(jù) 輸:

Wi-Fi、USB、藍(lán)牙

      口:

3×2.0USB、以太網(wǎng)、DVI端口

環(huán) 度:

5~45°C

環(huán) 度:

10%~90%,無冷凝

統(tǒng):

自動化進(jìn)樣,具有自動混勻和自動清洗功能,降低樣本間交叉污染

統(tǒng):

完全自動化控制,包含開關(guān)機(jī)、樣品測試、儀器維護(hù)等自動化程序

自定義設(shè)置:

根據(jù)不同研究目標(biāo)自定義花粉測量和分析協(xié)議

數(shù) 據(jù) 析:

軟件支持多次測量結(jié)果(不限個數(shù))的疊加分析,適用于不同處理、不同發(fā)育階段的對比,且同時支持門控數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析

數(shù) 據(jù) 型:

支持.CSV、.HTML、.PNGBMP、JPGDOCX、ODTLaTex、Markdown九種格式


應(yīng)用案例分享:

啤酒釀造過程中酵母菌種、酵母接種量、酵母使用代數(shù)、發(fā)酵工藝條件等都會影響啤酒的風(fēng)味在此過程中,密切關(guān)注酵母活力和酵母密度是控制和改進(jìn)發(fā)酵過程的關(guān)鍵。Ampha X30能夠在啤酒釀造生產(chǎn)過程,高通量、快速、精準(zhǔn)監(jiān)控啤酒酵母細(xì)胞的活力、濃度、代謝、繁殖和健康狀態(tài),實(shí)時評估溫度、滲透壓、培養(yǎng)條件等因素對酵母菌的影響,進(jìn)而及時優(yōu)化發(fā)酵工藝。


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啤酒釀造過程中酵母菌密度、活性及酒精濃度的變化


       該案例分析了啤酒釀造過程中,啤酒酵母菌密度、活性及酒精濃度的變化。如圖所示發(fā)酵1天后 (紅),酵母細(xì)胞從滯后期進(jìn)入早期指數(shù)(對數(shù))期;第1-2天為發(fā)生細(xì)胞顯著增殖的指數(shù)生長期 (綠);第3天,由于細(xì)胞的劇烈增殖和營養(yǎng)物質(zhì)的耗盡,高相位酵母群逐漸向低相位移動(紅-綠-藍(lán),活力逐漸降低)。該過程反映了發(fā)酵罐中酵母活性及發(fā)酵條件的變化,即發(fā)酵初期酵母細(xì)胞濃度低、活力低且發(fā)酵罐中存在大量氧氣,當(dāng)發(fā)酵罐中的氧氣全部消耗完后,酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)入?yún)捬醢l(fā)酵產(chǎn)生乙醇,乙醇濃度迅速增加并逐漸對酵母細(xì)胞產(chǎn)生毒性,導(dǎo)致酵母細(xì)胞活性降低。



A    Fresh Culture

B     Old Culture

                                                            image.png                                                                                                                                                   image.png    


                                                                      

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不同培養(yǎng)時期BL2細(xì)胞的阻抗相位和細(xì)胞活力的變化


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Staurosporine誘導(dǎo)下BL2細(xì)胞的凋亡過程


      腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)是研究癌變機(jī)理、抗癌藥檢測、癌分子生物學(xué)極其重要的手段,監(jiān)測藥物對腫瘤細(xì)胞的影響對闡明和解決癌癥將起著不可估量的作用。該案例研究了Staurosporine對BL2淋巴瘤細(xì)胞的影響。從圖中可以看出,在Staurosporine處理1小時后,BL2細(xì)胞活性(藍(lán))顯著下降,而對照組(黑)BL2細(xì)胞在10小時內(nèi)始終保持高活性,之后才逐漸下降。Ampha X30無需進(jìn)行細(xì)胞的染色、標(biāo)記或培養(yǎng),可在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)過程中隨時檢測腫瘤細(xì)胞生理特性的變化,準(zhǔn)確評估腫瘤細(xì)胞對凋亡誘導(dǎo)劑、細(xì)胞毒劑的劑量反應(yīng)或分化、凋亡進(jìn)程。


人體和動物細(xì)胞,特別是哺乳動物細(xì)胞,在藥物研究、藥效表達(dá)、臨床診斷等應(yīng)用中發(fā)揮著重要作用。哺乳動物細(xì)胞常被用于生產(chǎn)抗體、蛋白質(zhì)、疫苗、再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域,中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)是目前全球研究較多的一種表達(dá)系統(tǒng),在生物制藥領(lǐng)域中應(yīng)用較為廣泛。

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       本案例利用Ampha X30監(jiān)測了CHO細(xì)胞在三周內(nèi)的發(fā)育變化,上圖為第4天(藍(lán)色)、9天(紅色)和19天(綠色)的CHO細(xì)胞相位角-振幅散點(diǎn)疊加圖,散點(diǎn)圖左下方的小群體代表死亡細(xì)胞,而右側(cè)的大群體代表活性細(xì)胞,從疊加圖中可以看到CHO細(xì)胞活性在前9天里并未發(fā)生變化,而在第19天,散點(diǎn)圖顯著向較低相位角偏移,這表明由于缺乏底物CHO細(xì)胞逐漸失去活性。


基于昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)自身的特點(diǎn)和優(yōu)勢,目前已被廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、疫苗生產(chǎn)、重組病毒殺蟲劑等眾多領(lǐng)域。Ampha X30可幫助在Sf9昆蟲細(xì)胞BV感染過程中檢測細(xì)胞活力變化、確定多重性感染(MOI)范圍、篩選理想的表達(dá)條件并預(yù)測BV昆蟲細(xì)胞系統(tǒng)中收獲胞內(nèi)蛋白的最佳時間。


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感染桿狀病毒(BV)數(shù)小時內(nèi)Sf9昆蟲細(xì)胞活性的變化


      如案例所示,Sf9昆蟲細(xì)胞在感染BV后的數(shù)小時(hpi)內(nèi),Ampha X30細(xì)胞分析儀所獲得的相位-振幅散點(diǎn)圖可明顯分離出三個細(xì)胞類群,分為是活細(xì)胞(viable)、感染晚期(LPI)和死細(xì)胞(dead)類群。感染48hpi后,活細(xì)胞的阻抗振幅降低(細(xì)胞萎縮)且數(shù)量逐漸減少,直至99hpi細(xì)胞全部死亡。感染晚期(LPI)細(xì)胞類群出現(xiàn)在較低相位,這部分細(xì)胞在0-60hpi逐漸增加隨后減少直至消失。


腫瘤患者來源的異種移植(PDX)是進(jìn)行化療藥物敏感性和毒性評估的有效手段,對預(yù)測化療療效十分重要。藥物處理后,細(xì)胞分泌亞細(xì)胞凋亡小體(ABs)和微泡(MVs)的數(shù)量、大小和內(nèi)容物的變化可以反映藥物對細(xì)胞的作用效果。如果 ABs 大量產(chǎn)生,通常意味著細(xì)胞發(fā)生了明顯的凋亡,提示藥物可能具有較好的抗腫瘤活性,而分析 ABs 和 MVs 的內(nèi)容物和釋放規(guī)律,有助于深入了解藥物作用于細(xì)胞的具體靶點(diǎn)和信號通路。


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不同濃度的吉西他濱誘導(dǎo)下PDAC細(xì)胞系的凋亡變化(顯微鏡鏡檢vs. 流式細(xì)胞術(shù)vs. Ampha Z32


      該研究通過不同方法評估了不同藥物濃度下PDAC細(xì)胞系的凋亡變化,結(jié)果表明X30可在不同的腫瘤微環(huán)境模型和藥物類型下高通量、非標(biāo)記、快速無損檢測ABs表型并追蹤細(xì)胞凋亡過程,進(jìn)而準(zhǔn)確評估藥物敏感性和毒性,是一個測量單細(xì)胞電生理學(xué)特性的有效工具,不僅免除了費(fèi)力耗力的細(xì)胞收集和染色標(biāo)記過程,還可避免因染色不當(dāng)所造成的細(xì)胞凋亡。


納米材料廣泛應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、食品、日用品、醫(yī)藥等各個領(lǐng)域的同時,已不可避免的給我們的環(huán)境和健康帶來不利影響。因此,為確保納米材料的安全性,促進(jìn)納米技術(shù)的發(fā)展,進(jìn)行納米材料毒性評估十分必要且緊迫。Ampha X30可以非標(biāo)記、高通量、快速評估納米材料的毒性,避免假陰性或假陽性的檢測結(jié)果,是一種可靠且經(jīng)濟(jì)高效的檢測方法。


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U937細(xì)胞對NM-300KAg,100μg/ mL)的急性毒性效應(yīng)


隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展和創(chuàng)新,藻類發(fā)酵技術(shù)逐漸應(yīng)用在生物工程、食品工業(yè)以及可再生能源等領(lǐng)域。微藻是自然界食物鏈中脂肪酸的主要來源,是當(dāng)前生物能源和生物化工領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。但與其他類型的細(xì)胞相比,微藻細(xì)胞體積較小且具有自發(fā)熒光,因此傳統(tǒng)光學(xué)分析方法難度極大。Ampha X30基于細(xì)胞本身的電特性,不受自身熒光或細(xì)胞大小的影響,可以有效監(jiān)測生物反應(yīng)器中脂肪酸的過生產(chǎn)過程,幫助篩選合適的微藻種類、優(yōu)化培養(yǎng)條件(如光照、溫度、營養(yǎng)鹽濃度等)以實(shí)現(xiàn)高效、可持續(xù)的脂肪酸生產(chǎn)。


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產(chǎn)地:瑞士Amphasys



收 藏
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